A 14–20 KDA PROTEIN BINDS TO THE UPSTREAM REGION OF THE PHTM OPERON INVOLVED IN THE SYNTHESIS OF PHASEOLOTOXIN IN PSEUDOMONAS SYRINGAE PV. PHASEOLICOLA NPS3121

Abstract

Pseudomonas syringae pv. phaseolicola es una bacteria patógena del frijol que produce una fitotoxina conocida como faseolotoxina. En la síntesis de dicha molécula se encuentran involucrados un grupo de genes que conforman el denominado cluster Pht. Este cluster comprende 23 genes, ordenados en 5 unidades transcripcionales —2 monocistrónicas (argK, phtL) y 3 poliscistrónicas (phtA, phtD, phtM)—, cuya expresión se encuentra incrementada a 18 °C, en correlación con la producción de faseolotoxina por la bacteria. Hasta ahora, los mecanismos regulatorios involucrados en la síntesis de faseolotoxina han sido poco estudiados. El objetivo de este trabajo fue buscar y caracterizar proteínas regulatorias involucradas en la síntesis de faseolotoxina, colocando el foco en la regulación del operón phtM. Los ensayos de cambio en la movilidad electroforética mostraron que la región promotora del operón phtM contiene sitios de unión para posibles proteínas regulatorias, codificadas fuera del cluster Pht e independientes del sistema de dos componentes GacS-GacA. El sitio de unión para estos factores de transcripción está localizado en una región de 58 pb. Los resultados demuestran, además, que el probable factor de transcripción del operón phtM tiene una masa molecular aparente de 14-20 kDa y que reconoce y se une a la región río arriba de phtM como monómero o multímero de un solo polipéptido. Este estudio aporta nuevos hallazgos dentro de los mecanismos regulatorios involucrados en la síntesis de faseolotoxina, los que indican que el cluster Pht se integró a los mecanismos regulatorios de P. syringae pv. phaseolicola.